分析黃曲霉素的幾種通用的方法有幾種？

　　黃曲霉素是主要由黃曲霉寄生曲霉產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物，在濕熱地區(qū)食品和飼料中出現(xiàn)黃曲霉素的機(jī)率很高。是霉菌毒素中毒性最大、對人類健康危害極為突出的一類霉菌毒素。黃曲霉素檢測的通用方法有幾種？

　　1、薄層層析法

　　薄層層析是在黃曲霉素研究方面應(yīng)用很廣的分離技術(shù).自1990年它被列為AOAC (Association of Official Agricultural Chemists)標(biāo)準(zhǔn)方法，該方法同時具有定性和定量分析黃曲霉素的功能。

　　2、液相色譜法

　　液相色譜與薄層層析在許多方面具有相似性二者互相補(bǔ)充.通常用TLC進(jìn)行前期的條件設(shè)定選擇適宜的分離條件后再用LC進(jìn)行黃曲霉素的定量測定。

　　3、免疫化學(xué)分析方法

　　(1) 免疫親和柱-熒光分光光度法和免疫親和術(shù)-HPLC法

　　免疫親和柱法和酶聯(lián)免疫吸附法雖然都可達(dá)到速簡便效果但酶聯(lián)免疫吸附法僅能檢測單一毒素(如黃曲霉素B1)含量，而且易出現(xiàn)假陽性結(jié)果難以控制.免疫親和柱法(包括熒光光度法和HPLC法)卻能達(dá)到既定量準(zhǔn)確又快速簡便的要求。

　　免疫親和柱的使用可以避免傳統(tǒng)TLC和HPLC的缺點(diǎn)，同時免疫親和柱與TLC和HPLC法結(jié)合可以大大提高工作效率提高靈敏度和準(zhǔn)確度。

　　黃曲霉素免疫親和柱-熒光光度計法是以單克隆免疫親和柱為分離手段，用熒光計紫外燈作為檢測工具的快速分析方法。它克服了TLC和HPLC法在操作過程中使用劇毒的真菌毒素作為標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)物和在樣品預(yù)處理過程中使用多種有毒，異味的有機(jī)溶劑毒害操作人員和污染環(huán)境的缺點(diǎn).同時黃曲霉素免疫親和柱-熒光光度計法分析速度快，一個樣品只需10-15min，比傳統(tǒng)方法快幾個小時甚至幾天時間；儀器設(shè)備輕便容易攜帶自動化程度高，操作簡單直接讀出測試結(jié)果，可以在小型實(shí)驗(yàn)或現(xiàn)場使用.可以進(jìn)行黃曲霉素總量 (B1B2G1G2) 的測定檢測限可達(dá)到1ug/kg，達(dá)到黃曲霉素標(biāo)準(zhǔn)*值以下測定范圍為1-300ug/kg。

　　黃曲霉素免疫親和柱-高效液相色譜法比傳統(tǒng)的HPLC法更加安全可靠，靈敏度和準(zhǔn)確度高。它采用單克隆抗體免疫技術(shù)可以*性地將黃曲霉素或其他真菌毒素分離出來，分離效率和回收率高。

　　分析原理試樣中的黃曲霉素用一定比例的甲醇/水提取液經(jīng)過過濾稀釋后，用免疫親和柱凈化以甲醇將親和柱上的黃曲霉素淋洗下來，在淋洗液中加入溴溶液衍生以提高測定靈敏度，然后用熒光分光光度計進(jìn)行定量。也可以將甲醇-黃曲霉素淋洗液的一部分注入HPLC中對黃曲霉素B1，B2，G1，B2分別進(jìn)行定量分析.免疫親和柱是用大劑量的黃曲霉素單克隆抗體固化在水不溶性的載體上然后裝柱而成.該方法的測定范圍0-300ug/kg。

　　(2) 酶聯(lián)免疫吸附法

　　將已知抗原吸附在固態(tài)載體表面洗除末吸附抗原，加入一定量抗體與待測樣品(含有抗原)提取液的混合液競爭培養(yǎng)后，在固相載體表面形成抗原抗體復(fù)合物.洗除多余抗體成分然后加入酶標(biāo)記的抗球蛋白的第二抗體結(jié)合物，與吸附在固體表面的抗原抗體結(jié)合物相結(jié)合再加入酶底物。在酶的催化作用下，底物發(fā)生降解反應(yīng)產(chǎn)生有色物質(zhì)，通過酶標(biāo)檢測儀測出酶底物的降解量從而推知被測樣品中的抗原量。

　　(3) 微柱篩選法

　　可以用來半定量測定各種食品中黃曲霉素B1，B2，G1，G2的總量。

　　原理：樣品提取液中的黃曲霉素被微柱管風(fēng)硅鎂型吸附層吸附后在波長365nm紫外光燈下顯示藍(lán)紫色熒光環(huán)，其熒光強(qiáng)度與黃曲霉素在一定的光密度范圍內(nèi)成正比例關(guān)系.若硅鎂型吸附劑層未出現(xiàn)藍(lán)紫色熒光則樣品為陰性(方法靈敏度為5-10ug/kg).由于在微柱上不能分離黃曲霉素B1，B2，G1，G2，所以測得結(jié)果為總的黃曲霉素含量。

　　(4) 一步式黃曲霉素檢測金標(biāo)試紙法

　　一步式黃曲霉素檢測金標(biāo)試紙法是利用單克隆抗體而設(shè)計的固相免疫分析法。由此產(chǎn)生的一步式黃曲霉素快速檢測試紙可在5-10分鐘完成對樣品中黃曲霉素的定性測定.借助黃曲霉素標(biāo)準(zhǔn)樣品這種方法能估算黃曲霉素的含量，非常適用于現(xiàn)場測試和進(jìn)行大量樣品的初選。

　　4、抵抗方法

　　當(dāng)然，這只是一項(xiàng)動物研究，對人體來說，葉綠素是不是也有同樣的作用呢？葉綠素是一種*的化學(xué)保護(hù)物質(zhì)，對抗致癌物的作用非常有效，從減少吸收，到減少致癌物與遺傳物質(zhì)的作用，直到減少各組織的癌前病變出現(xiàn)，各環(huán)節(jié)都有明顯的效果。

　　5、快速辨別

　　黃曲霉素是很苦的，食用花生、核桃等食物時如果感覺很苦，馬上吐出來，并漱口。發(fā)霉的花生、核桃等都容易產(chǎn)生黃曲霉素。